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Flash柱已經(jīng)成為天然產(chǎn)物粗品純化或者有機(jī)合成反應(yīng)體系純化時(shí)更常用的工具之一。而當(dāng)各位小伙伴在深入了解了Flash柱的純化方式后又會發(fā)現(xiàn)，樣品的上樣方式是影響分離效果的重要因素之一。

在Flash色譜中，樣品可以通過兩種不同的方式上樣：固體或液體。液體上樣，是將樣品溶解在溶劑中后，直接注入Flash柱上。固體上樣，是將粗樣品與載體材料（如硅膠）的固體均勻混合物放在Flash柱前面。

當(dāng)樣品若單次進(jìn)樣量少且在流動(dòng)相中易溶解時(shí)通常我們會選擇液體上樣的方法。采用液體上樣時(shí)主要考慮的因素有：

化合物在初始溶劑中的溶解度：樣品需要完全溶解。

溶解溶劑的極性：通常正相柱多采用弱極性溶劑，反相柱采用極性溶劑。

樣品溶劑的體積：理想的樣品體積不應(yīng)超過Flash柱體積的10%。

樣品量：每根色譜柱都有規(guī)定的上樣量。理想的樣品量不應(yīng)超過Flash柱的更大上樣量。

那么當(dāng)我們遇到進(jìn)樣的樣品量較大的時(shí)候，或用于分離具有難以溶解的粘性或多雜質(zhì)樣品，就需要考慮采用固體上樣了。固體上樣通常通過以下步驟完成：

將粗樣品溶解在合適的溶劑中。

然后，將該混合物在超聲浴中超聲幾分鐘，以提高溶解度。

過濾混合物以除去尚未完全溶解的物質(zhì)。

將硅膠以粗樣品重量的2-3倍添加到上述混合物中。

溶劑通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀完全地減壓蒸餾干。

更后，將粗樣品和硅膠的混合物裝入固體裝樣器或者空柱管中，然后將其安裝在Flash柱的上面。連接溶劑洗脫流路。

待分離的組分不斷地從固體裝樣器中洗脫到實(shí)際分離Flash柱中。

固體上樣可以有效減輕純化時(shí)拖尾的情況，尤其是在洗脫體系或其他弱極性溶劑中溶解度較小的樣品，能夠得到較窄的色帶和峰形，且上樣時(shí)平鋪均勻，樣品色帶下降時(shí)也會平整。

盡管液體上樣簡單方便，固體上樣相對繁瑣一些，但當(dāng)您遇到樣品峰型不理想的時(shí)候，固體上樣往往能提高柱效以及樣品純度。